“首先是聚合酶链式反应,即PCR扩增反应;第二步是酶切反应。”
张兴运介绍道。
第一步,在PCR扩增反应部分,只需要跟着想要的结果,明确各种试剂和样品的加入量以及扩增条件,按照正常的要求操作即可。
需要注意的是,吸取试剂时,一定要排尽气泡,由于试剂的加入量都非常小,滴加试剂时,常常出现试剂聚集在枪头尖端,形成一个小液滴,难以滴下,可以将液滴打到离心管内壁上。
利用其与离心管内壁的吸附作用力,将液滴留在离心管内。
最后,再用无菌超纯水补足3滴反应体系后,将离心管盖盖好,至于离一t2机中,离心30秒,以使试剂、样品和水在离心管底部充分混匀。
更有利于PCR反应的顺利进行,可以大大增加扩增反应的成功率。
至于酶切反应。
可以在滴加实验一得到的结果后,再滴加适量BSA,它是一种酶切反应催化剂,能够使酶切反应进行更彻底。
酶切效果更好:通常试剂一与BSA的体积比约为1:2。
“我们在在川贝母的PCR鉴别试验中,SmaI加入量为0。5斗l,BSA的加入量为1斗。滴加BSA后,酶切反应的体系仍为20斗,所以无菌超纯水的加入量要相应减少。酶切反应的条件应设置为30,反应2h。”张兴运说道。
陈浩然还是沉默。
但这种沉默已经代表了一种态度。
不赞同,不拒绝。就静静的看着,即便你作死也好,即便你成仙也罢,他都这么静静的看着。
当然,实验室里面的实验还在继续。
“电泳检测酶切反应完成后所得到的溶液。得到的结果是?”杨光问道。
“含有标准规定的长度在100~250bp的两条DNA条带,需要用琼脂糖凝胶电泳法进行检视。”终于回答道。
走到这一步,实验的还在继续。
但至少杨光并没有再提出什么质疑。
钟医和杨光还是按照实验步骤再进行,首先,需要制胶和配制电泳缓冲液,制胶用缓冲液和电泳缓冲液应保持一致,用百分之1的TAE或TBE即可。
“注意,在制胶过程中注意做好防护,切勿烫伤。”钟医提醒道。
“假好心。我会出事?”杨光没气的说道。
两人,待胶溶液温度下降至60℃左右时,滴加少量GelRed,振摇混匀后缓慢倾倒人插好梳子的胶槽中,他们尽量不产生气泡,以免影响电泳效果。
待胶凝固并冷却至室温后。即可将其转移至电泳槽中,准备电泳。
下一步,两人依次将样品、对照药材、空白对照加入胶孑L中。
杨光特别小心,手十分稳,没有戳破胶孑L边缘或戳穿胶孔底部。以免影电泳效果。
“他们现在再加加样缓冲液,这样做主要是两个作用。”
“一方面其密度较大,可使样品沉积在胶孔底部,避免样品上浮外溢,保障电泳条带密集紧凑,防止扩散。”
“另一方面,其中添加染色剂。可以在电泳过程中指示前沿。电泳结束后。可将凝胶置于凝胶成像仪上进行检视。”
张兴运说道。
而杨光这么一路实验坐下来,正如张兴运在报告之中所写的那样。
在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上,在100~250bp应有两条DNA条带,空白对照无条带。
只有一点有点问题。
“为什么其中有一条条带中出现弥散的情况?”杨光疑惑的问道。
“出现弥散的原因只可能两种。”钟医想了想回答道:“一方面可能是制胶所用缓冲液与电泳缓冲液不一致,应保持一致。另一种,可能是电泳缓冲液长期未更换,缓冲盐浓度变化,或缓冲液被污染,应及时更换缓冲液。”
钟医的回答打消了杨光的疑惑。
实验做到这儿,杨光也明白了,钟医没有撒谎,张兴运的报告百分之百真实。
整个实验的难点就在于酶切反应。
但是两人都是实验室的好手,自然不会因为这一点小问题出问题。
“现在华夏有什么重要是用了分子生物学技术在中药鉴定方面吗?我说的是已经有标准的。”杨光问道。
“目前仅有蕲蛇、乌梢蛇的分子生物学鉴别收入我国医药中标准,分别采用了PCR和聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性鉴别方法。还有就是我们刚刚做的川贝了。”钟医回答道。htTΡδ://WwW.ЪǐQiKǔ.йēT
是的,分子生物学技术在中药鉴定方面的应用方兴未艾。
这是一场危机,也是一个机遇。
就如同DNA条形码方法在中药材鉴定方面取得较好的效果一样。
中药鉴定道阻且长,需要经验鉴别、分子生物学技术、理化鉴别和显微技术的共同合作。才能真正实现中药材和饮片的明确鉴定,才能保障中药和中医产业的长足发展。
“我无话可说,我这边让你们过了。”杨光摆了摆手说道。
是的,从科学上,从实验上,从药理上,杨光都无话可说。
在钟医的指导下,杨光的这个研究严密到不可思议的一个地步,让人想要从中早一点什么错误出来都特别的难。
听到杨光这么说,外面已经传来了压抑不住的欢呼声。
“张兴运医生这也太强了吧。他不是中医嘛,竟然也能让杨光哑口无言。”
“废话,只要道理还是那个道理,那么掌握真理的人一定不怕什么的。”
“我们赢了吗?这一局我们赢了吗?”
“看来真理还是站在我们这一边的。”
中医院的众人已经按捺不住喜悦了,纷纷的笑了起来,说话的声音都开始变大了。
这还不是重头戏。
几大药厂那边也在交头接耳,像是在商量着什么,虽然不知道他们小声在说些什么。不过从他们眼神中流露出的渴望和饥渴,也能够看出他们的目的了。
“我们哈市对这个药志在必得啊。你们不知道,我们一到冬天就容易出现这些状况,现在有一个药这么好……”纪建同说道。
“等等。我们沪市可不会让啊。”范乐生也连忙打断了纪建同。
这才开始,药厂就已经争了起来。 无尽的昏迷过后,时宇猛地从床上起身。想要看最新章节内容,请下载星星阅读app,无广告免费阅读最新章节内容。网站已经不更新最新章节内容,已经星星阅读小说APP更新最新章节内容。
他大口的呼吸起新鲜的空气,胸口一颤一颤。
迷茫、不解,各种情绪涌上心头。
这是哪?
随后,时宇下意识观察四周,然后更茫然了。
一个单人宿舍?
就算他成功得到救援,现在也应该在病房才对。
还有自己的身体……怎么会一点伤也没有。
带着疑惑,时宇的视线快速从房间扫过,最终目光停留在了床头的一面镜子上。
镜子照出他现在的模样,大约十七八岁的年龄,外貌很帅。
可问题是,这不是他!下载星星阅读app,阅读最新章节内容无广告免费
之前的自己,是一位二十多岁气宇不凡的帅气青年,工作有段时间了。
而现在,这相貌怎么看都只是高中生的年纪……
这个变化,让时宇发愣很久。
千万别告诉他,手术很成功……
身体、面貌都变了,这根本不是手术不手术的问题了,而是仙术。
他竟完全变成了另外一个人!
难道……是自己穿越了?
除了床头那摆放位置明显风水不好的镜子,时宇还在旁边发现了三本书。
时宇拿起一看,书名瞬间让他沉默。
《新手饲养员必备育兽手册》
《宠兽产后的护理》
《异种族兽耳娘评鉴指南》
时宇:???
前两本书的名字还算正常,最后一本你是怎么回事?
“咳。”
时宇目光一肃,伸出手来,不过很快手臂一僵。
就在他想翻开第三本书,看看这究竟是个什么东西时,他的大脑猛地一阵刺痛,大量的记忆如潮水般涌现。
冰原市。
宠兽饲养基地。
实习宠兽饲养员。网站即将关闭,下载星星阅读app为您提供大神蜀都小侯爷的重振中医
御兽师?
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